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ELISA和流式有啥不同,一个例子讲清楚

更新时间:2026-05-28点击次数:73
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细胞因子是免疫细胞或非免疫细胞合成和分泌的具有生物活性的多肽或蛋白质。
检测细胞因子最常见的方法就是ELISA。这个实验的具体原理咱们就不说了哈。
➡️直接法、间接法、夹心法、竞争法......这么多类型的ELISA到底有什么区别?
ELISA测的细胞因子是从细胞内分泌到胞外的游离细胞因子,它可以明确定量这群细胞分泌细胞因子的能力,同时也可以证明这群细胞除了能合成出这种细胞因子,还能把它分泌出胞外产生作用。
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以上是ELISA能做的,但它做不到的是什么呢?
它无法区分出样本细胞中的哪一种或哪几种细胞、细胞亚群能合成细胞因子,因为细胞因子都分泌出来到外面了嘛。
而另一种实验方法则互补了这个分析需求——流式胞内染色。
其原理是利用荧光素偶联的抗细胞因子的单抗,如果细胞能合成该细胞因子,那么抗体与细胞因子结合时,细胞就带上荧光素,并在相应激光激发后产生荧光信号。
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它和流式检测细胞表面抗原很像。但区别在于活细胞是排斥这些荧光素偶联抗体的,直接标记做不到。
因此只能先固定细胞,让它保持一定的形状,接着破坏细胞膜——本质上不是破坏整个膜,而是在膜上打孔。这样,抗体就能进入胞内和细胞因子结合了。
所以,流式胞内染色测细胞因子,能明确知道某个细胞因子来自哪些细胞,并且可以算出这些细胞在整个样本中的比例
两种方法各有千秋,不能说哪种方法绝对更好。流式胞内染色更像是一种定性分析,先明确细胞是否能产生细胞因子,后续再根据需要进一步分选或定量分析。
而ELISA就是妥妥的定量分析工具,可以作为胞内染色分析之后的下一步分析。
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例如,要敲定某个细胞是否能合成和分泌特定的细胞因子时,可以用这两种方法配合分析。如果两种方法都能得到阳性结果,就可以明确结论。
最后,一句话总结一下今天的内容:测细胞因子,流式胞内染色能知道它来自什么细胞,这些细胞的比例如何;ELISA能给出细胞因子的量。

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