精准量化胆固醇代谢的关键工具——小鼠胆固醇7α羟化酶试剂盒解析
更新时间:2025-10-20
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小鼠胆固醇7α羟化酶(CYP7A1)试剂盒是基于酶联免疫吸附测定(ELISA)技术研发的重要科研工具,专注于定量检测小鼠样本中CYP7A1的表达水平。该酶由肝脏细胞合成,催化胆固醇转化为胆汁酸,是胆固醇代谢的核心调控因子。以下是对该试剂盒的详细介绍:
技术原理与结构设计
本试剂盒采用双抗体夹心法进行检测。预先包被的特异性抗体捕获样本中的CYP7A1抗原,随后加入生物素标记的检测抗体形成复合物,再通过亲和素-辣根过氧化物酶(HRP)放大信号。最终加入底物显色,通过酶标仪测定吸光度,实现高灵敏检测。板内变异系数严格控制在一定比例以内,确保实验结果的稳定性和可靠性。
技术特点与性能优势
高灵敏度与宽检测范围:典型检测范围为0.31-20ng/mL,可准确量化微量表达;
高特异性:经验证与其他相似物质无明显交叉反应,适合复杂样本检测;
多样本适用性:支持血清、血浆、细胞上清等多种样本类型,满足不同科研场景需求;
便捷高效:提供96T/48T两种规格,适配高通量筛选;多数厂商提供免费代测服务,缩短科研周期。
实验操作与注意事项
操作流程主要包括准备试剂、包被、洗涤、加样、温育、再加酶标记物、洗涤、加底物、终止反应和读数等步骤。使用时需注意以下关键点:一是试剂应按规定温度保存,使用前恢复至室温;二是避免重复使用标准品,充分混匀反应体系;三是严格遵循洗涤步骤,减少非特异性结合;四是控制温育时间和温度,保证结果准确性。
科研应用与价值
该试剂盒广泛用于代谢性疾病研究,通过检测CYP7A1活性可评估胆固醇向胆汁酸转化效率,揭示胆结石、高胆固醇血症等疾病的发病机制。此外,还可应用于药物研发领域,筛选能够调节CYP7A1活性的新型降脂药物。
总之,小鼠胆固醇7α羟化酶试剂盒凭借其高灵敏度、高特异性和广泛的样本适用性,已成为研究胆固醇代谢机制的重要工具。随着技术的不断进步和应用需求的增加,该试剂盒将在更多领域发挥重要作用,推动相关疾病的研究和治疗取得新的突破。