什么是ELISA？

更新时间：2025-10-09

点击次数：141

说清楚四种ELISA及其应用

什么是ELISA？

酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）是一种基于抗原-抗体特异性反应的免疫学检测技术，用于对样本中特定物质的进行定性和定量分析，也用于抗体开发过程中的抗体筛选，是抗体高通量筛选的基石。

ELISA技术的核心主要有两点：抗体与抗原的特异性结合和酶标信号放大效应。

常见的ELISA类型主要有四种：直接ELISA、间接ELISA、双抗夹心ELISA和竞争ELISA。

直接法ELISA（Direct ELISA）

直接法ELISA是很简单的ELISA，通过酶标一抗直接与靶标抗原结合，显示信号；对直接标记的一抗要求高，无需二抗，一般用于初步筛选和快速检测。

直接法虽然速度快，但是通常情况下会产生高背景、检测灵敏度较低、容易产生非特异性结合；因此主要用于初步筛选和快速检测。

间接法ELISA（Indirect ELISA）

间接法ELISA先用一抗识别并结合靶标抗原，然后通过酶标二抗产生并放大信号来检测靶标样品；与直接法相比，多了酶标二抗的孵育结合，时间上要比直接法长，但是检测灵敏度提高了，不需要直接标记的一抗，对一抗的要求也没有那么高。

检测法主要用于病原体抗体检测和诊断，疫苗接种后抗体评价，以及抗体开发过程中抗体的筛选。

双抗夹心ELISA（Sandwich ELISA）

双抗夹心法是指通过捕获抗体和检测抗体分别结合同一个抗原的不同表位，形成“双抗夹心三明治"结构，捕获抗体抓取样品中的靶标抗原，酶标检测抗体产生信号，计算靶标抗原的含量。

双抗夹心ELISA大分子检测中常用的方法，它的检测特性好、灵敏度高，适合用于复杂样品中靶标蛋白的检测，在体外诊断、科研样品检测中被广泛地应用；它几乎是检测低丰度靶标蛋白的金标准方法。

竞争法ELISA（Competitive ELISA）

竞争法ELISA是指通过待检测抗原与标记抗原竞争结合有限抗体分子，信号强度与待检测抗原浓度成反比（待测抗原浓度越高，信号越小；待测抗原浓度越低，信号越高）的一种ELISA技术，主要用于检测小分子抗原。

竞争法ELISA一般是将抗体固定在固相载体上，封闭之后，同时加入待测样品（含待测抗原）和酶标抗原（已知浓度），两者竞争结合有限的包被抗体，待测抗原含量越高，酶标抗原结合越少，信号就越弱。

竞争法ELISA适合用于小分子抗原的检测，主要用于食品安全药物残留、抗生素残留、霉菌毒素检测，体外诊断，环境检测等。

这里顺便说一下，竞争法ELISA也可以包被抗原，用来检测样品中抗体的浓度。

娜连生物总结：常见的ELISA主要有四种：直接法ELISA、间接法ELISA、双抗夹心法ELISA和竞争法ELISA，双抗夹心ELISA主要用于蛋白抗原的检测，竞争法ELISA主要用于小分子的检测，直接法ELISA和间接法ELISA主要用于初筛检测和抗体筛选。