大鼠载脂蛋白B100试剂盒：动脉粥样硬化研究的关键工具

载脂蛋白B100（Apolipoprotein B100，简称ApoB100）是低密度脂蛋白（LDL）和极低密度脂蛋白（VLDL）颗粒中的主要结构蛋白，在脂质代谢和动脉粥样硬化（Atherosclerosis）的发生发展中扮演核心角色。作为反映致动脉粥样硬化脂蛋白颗粒数量的直接指标，ApoB100的水平比传统血脂检测（如总胆固醇、LDL-C）更具预测价值。在心血管疾病研究中，大鼠是常用的动物模型，因此，大鼠载脂蛋白B100试剂盒成为评估实验性高脂血症、脂代谢紊乱及动脉粥样硬化进展检测工具。本文将系统介绍该试剂盒的原理、技术特点、应用价值及操作要点。

一、ApoB100的生物学意义与研究价值

ApoB100由肝脏合成，是VLDL和LDL的蛋白成分，负责在血液中运输胆固醇和甘油三酯。每个VLDL或LDL颗粒仅含一个ApoB100分子，因此其血浆浓度直接反映了致动脉粥样硬化脂蛋白颗粒的总数。高水平的ApoB100意味着更多的LDL颗粒可渗透并滞留于血管内皮下，经氧化修饰后被巨噬细胞吞噬，形成泡沫细胞，最终导致动脉粥样硬化斑块的形成。

在大鼠模型中，尽管大鼠天然不易形成人类典型的动脉粥样硬化斑块，但通过高脂饮食、基因改造（如敲除LDL受体）或药物干预，可诱导其出现脂代谢异常和早期血管病变。检测大鼠血清或血浆中的ApoB100水平，能够：

-客观评估模型建立的成功与否；

-监测干预措施（如药物、饮食、运动）对脂蛋白代谢的影响；

-探究脂代谢相关基因或信号通路的功能；

-为新药研发提供药效学评价依据。

二、大鼠ApoB100试剂盒的技术原理

目前市面上的大鼠载脂蛋白B100试剂盒普遍采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法（Sandwich ELISA），其工作原理如下：

1.包被：微孔板预先包被了高特异性的抗大鼠ApoB100捕获抗体，可特异性结合样本中的ApoB100。

2.加样与孵育：将稀释后的标准品和待测大鼠血清/血浆样本加入微孔中，ApoB100与固相抗体结合。

3.洗涤：洗去未结合的杂质，减少背景干扰。

4.检测抗体结合：加入生物素标记的抗大鼠ApoB100检测抗体，该抗体与已结合的ApoB100形成“夹心”复合物。

5.酶结合：加入链霉亲和素-辣根过氧化物酶（SA-HRP）复合物，生物素与链霉亲和素高亲和力结合，使HRP标记到复合物上。

6.显色与终止：加入TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯胺）显色底物，HRP催化TMB生成蓝色产物；反应终止后变为黄色。

7.检测：使用酶标仪在450 nm波长处测定吸光度（OD值），OD值与样本中ApoB100的浓度成正比。通过标准曲线计算待测样本的ApoB100浓度。

三、试剂盒的关键性能指标与优势

1.高特异性：抗体经过严格筛选，仅识别大鼠ApoB100，不与ApoA1、ApoE等其他载脂蛋白交叉反应。

2.高灵敏度：检测下限通常可达1–5 ng/mL，能够准确检测低浓度样本。

3.宽检测范围：线性范围广（如10–1000 ng/mL），适用于不同病理状态下的样本检测。

4.重复性好：批内和批间变异系数（CV）通常<10%，保证数据可靠性。

5.操作简便：试剂预装或即用型设计，检测时间约2–4小时，适合高通量筛选。

四、应用实例与研究方向

1.高脂饮食模型研究：比较正常饮食组与高脂饮食组大鼠血清ApoB100水平，验证模型是否成功诱导脂代谢紊乱。

2.降脂药物评价：评估他汀类、PCSK9抑制剂等药物对ApoB100水平的抑制效果，反映其降低致动脉粥样硬化颗粒的能力。

3.基因功能研究：在ApoB、MTTP（微粒体甘油三酯转移蛋白）或LDL受体基因敲除/过表达大鼠中，分析ApoB100的表达变化。

4.炎症与代谢交叉研究：探讨慢性炎症因子（如TNF-α、IL-6）对肝脏ApoB100合成与分泌的影响。

五、操作注意事项

-样本处理：采集血液后尽快离心分离血清或血浆（EDTA或肝素抗凝），避免溶血；样本可短期4℃保存，长期需-80℃冻存，避免反复冻融。

-标准曲线：每次实验均需重新绘制，确保准确性。

-稀释优化：高浓度样本需进行预实验确定最佳稀释倍数，使OD值落在标准曲线线性范围内。

-严格洗涤：充分洗涤是降低背景、提高信噪比的关键。

大鼠载脂蛋白B100试剂盒作为连接基础研究与临床转化的桥梁，为深入理解脂代谢机制和动脉粥样硬化病理过程提供了精准、高效的检测手段。随着心血管疾病研究的不断深入，该试剂盒将在新靶点发现、药物筛选和机制验证中发挥愈加重要的作用，助力心血管健康领域的科学进步。